以A型流感病毒NP基因為靶標(biāo)，設(shè)計并合成了3對編碼發(fā)夾狀siRNA寡聚核苷酸。將合成的序列互補的寡聚核苷酸退火形成雙鏈，克隆至pSilencer 1.0-U6載體中，并轉(zhuǎn)化DH5a菌株，氨芐抗性篩選陽性菌落，擴大培養(yǎng)后，提取質(zhì)粒進(jìn)行酶切鑒定，并進(jìn)行測序分析。結(jié)果顯示，酶切后得到預(yù)期長度的DNA片段；插入序列插入的位置與設(shè)計完全一致，無堿基缺失或突變。表明A型流感病毒NP基因小干涉RNA表達(dá)載體構(gòu)建成功。